Till startsidan för Statens veterinärmedicinska anstalt

Provtagningsinstruktion för Kvarka-PCR

Kvarka är en mycket smittsam och allvarlig infektionssjukdom hos häst som orsakas av bakterien Streptococcus equi subspecies equi (S. equi).

Vid misstanke om kvarka rekommenderas alltid kvarka-PCR framför enbart odling, på grund av betydligt högre sensitivitet (färre falskt negativa prover). Kvarka-PCR kan kombineras med bakterieodling.

Kvarka-PCR detekterar och skiljer ut S. equi och S. zooepidemicus. Metoden spårar smittämnenas arvsmassa.

Provmaterial vid akut och kronisk infektion

Akut fas

  • Provtagning i akut fas för Kvarka-PCR sker helst med nässköljprov, vilket ger god sensitivitet (84%). I andra hand kan nässvabbprov med E-swab (Copan Innovation Ltd, Brescia, Italy) användas (sensitivitet 79%). Traditionell provtagningspinne avsedd för bakterieodling har en sämre sensitivitet (53%) vilket innebär fler falskt negativa prover och rekommenderas därför inte.
  • Böldsekret Provtas med E-swabb och gnugga gärna mot böldkapsel eller sänd in var. Begär Kvarka-PCR på remissen. Detta prov tas helst i kombination med annat prov.
  • Ta gärna prov från flera hästar med symtom i samma stall i akut skede eftersom kvarkabakterierna kan vara svåra att få med i provet, särskilt de första två till tre dagarna efter infektion.

Kronisk fas

  • Provtagning i kronisk fas (efter avläkning av kliniska symptom) för att identifiera tysta smittbärare, sker bäst med sköljprov från luftsäckarna med hjälp av endoskop, kombinerat med nässköljprov, och proverna bör analyseras med PCR. Om enbart nässköljprov görs, rekommenderas att det upprepas tre gånger på grund av metodens sämre sensitivitet vid denna fas av infektionen (fler falskt negativa prover).

Provtagningsinstruktion för nässköljprov för PCR på häst

Utrustning

  • Engångshandskar, ren brems, bomull, 120 ml natriumklorid (9 mg/ml) spolvätska, lämplig plastslang/kateter (längd 50 cm, innerdiameter 5-6 mm eller 12 French, till exempel en fölmatningssond med trattformad avslutning), bälg, plastpåse, ett 50 ml rör med skruvkork (gärna Falconrör).
  • Provtagningskit för nässköljprov kan beställas från SVA (telefon 018-67 43 00).

Gör så här:

  1. Undvik smittspridning och kontamination vid provtagning genom att desinficera/byta bremsen, tvätta och desinficera händerna och byta handskar mellan varje häst. Gäller både provtagare och assistenter.
  2. Hästen kan behöva bremsas eller sederas om den inte är van. Hästen ska hålla huvudet i neutral position eller gärna lågt.
  3. Torka ur den yttre delen av näshålan med en bomullstuss fuktad med fysiologisk koksaltlösning.
  4. För in plastslangen medialt och ventralt i näshålan på hästen, till höjd med ögat. En bälgförpackning med 120 ml natriumklorid eller en fylld spruta kan kopplas på redan innan slangen förs in.
  5. Spola in 120 ml fysiologisk koksaltlösning i nasofarynx. Vätskan ska sedan helst sippra ut ur båda sidornas näsborrar. Kontrollera att hästen inte sväljer all vätska, i så fall sänk hästens huvud. Om vätska bara kommer ur näsborren med slangen i, prova att gå in lite längre. Om det bara kommer från motsatta sidan kan man behöva dra tillbaka lite.
  6. En assistent samlar upp vätskan från nosen i ett höggradigt rent emballage (till exempel en plastpåse eller rektalhandske).
  7. Sköljvätskan överförs till ett märkt, höggradigt rent rör (gärna Falconrör). Eventuellt överksott av sköljvätskan kasseras.
  8. Ange på remissen att det är ett nässköljprov för kvarka-PCR och om odling också önskas.

Provtagningsinstruktion för nässvabbprov för PCR på häst

Utrustning

  • Engångshandskar, ren brems, bomull, koksaltlösning, E-swab provtagningspinne med transportmedium (Copan Innovation Ltd, Brescia, Italy). E-swab kan beställas från SVA (telefon 018-67 43 00).

Gör så här:

  1. Undvik smittspridning och kontamination vid provtagning genom att desinficera/byta bremsen, tvätta och desinficera händerna och byta handskar mellan varje häst. Gäller både provtagare och assistenter.
  2. Torka ur yttre delen av näshålan med en bomullstuss fuktad med fysiologisk koksaltlösning.
  3. Stryk en E-swab-pinne mot slemhinnan längre in i näshålan.
  4. Placera E-swab-pinnen i sitt rör, bryt av pinnen och sätt på locket. Märk röret med hästens namn och datum.
  5. Ange på remissen att det är ett nässvabbprov för kvarka-PCR och om odling också önskas.

Provtagningsinstruktion för luftsäckssköljprov för PCR på häst

Utrustning:

  • Engångshandskar, ren brems, sedativa, bomull, fysiologisk koksaltlösning (9 mg/ml), endoskop, ledare, två engångskatetrar till endoskopet, engångssprutor, kanyler avpassade till katetern, två 50 ml rör med skruvkork (gärna Falconrör).

Gör så här:

  1. Undvik smittspridning och kontamination vid provtagning genom att desinficera/byta bremsen, tvätta och desinficera händerna och byta handskar mellan varje häst. Gäller både provtagare och assistenter. Endoskop och ledare ska desinficeras mellan varje häst.
  2. Hästen sederas och bremsas. Hästen ska hålla huvudet i neutral position och inte för lågt.
  3. Endoskopet förs in i en luftsäck i taget, med hjälp av en ledare.
  4. Luftsäcken sköljs med 20 ml fysiologisk koksaltlösning från en ny engångsspruta, via en ny engångsslang som förts genom endoskopet, och sedan aspireras vätskan tillbaka. Minst cirka 10 ml bör återvinnas för analysen. Om vätskan rinner ut genom näsborrarna hålls hästens huvud för lågt.
  5. Överför aspiratet till ett uppmärkt, höggradigt rent rör med skruvkork. Röret märks med hästens namn och datum samt "Luftsäcksköljprov Höger/Vänster".
  6. Ange på remissen att det är ett luftsäckssköljprov för kvarka-PCR och om odling också önskas. Luftsäckssköljproverna kan analyseras separat eller slås ihop. Tänk på att luftsäckssköljprov nummer två i ordningen på samma häst kan vara kontaminerat av det första vid bedömningen av resultatet.

Referenser

Real-time PCR for detection and differentiation of Streptococcus equi subsp. equi and Streptococcus equi subsp. zooepidemicus. Veterinary Microbiology

Lindahl, S, Båverud, V, Egenvall, A, Aspán, A och Pringle, J. (2013) Comparison of sampling sites and laboratory diagnostic test for Streptococcus equi subsp. equi in horses from a confirmed strangles outbreaks. Journal of Veterinary Internal Medicine, 27: 542-547.

Hittade du informationen du sökte på den här sidan?

  • 5 Perfekt, jag hittade svaret på min fråga
  • 4
  • 3
  • 2
  • 1 Nej, inte alls